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飼料中的氮含量檢測

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【概述】

凱氏法測定樣品中的含氮量,即在催化劑作用下,用硫酸破壞有機物,使含氮物轉化成硫酸銨。加入強堿進行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,測出氮含量,將結果乘以換算系數6.25,計算出粗蛋白含量。

【樣品提取】

 樣品粉碎后全部通過40目篩,裝于密封容器中,防止樣品成分的變化。

【實驗/操作方法】

1          樣品的消化

稱取樣品0.5~1g(含氮量5~80mg)準確至0.0002g,放入消化管中,加入5g混合催化劑,與樣品混合均勻,再加入10ml硫酸,將消化管置于消化爐上加熱,直至呈透明的藍綠色,然后在繼續加熱,至少30分鐘。

2          SKD-08S2消化爐

操作(6個樣品和2個空白)

按”SET”鍵+“A/M”鍵3秒,跳出第二設置區程序參數修改界面。連續按“SET”鍵數次出來

檢查“RUN”=“3”,pro= “ 1 ”  ,再設置r1 =200,T1=5分鐘,c1=180度,r2=180,T2=5,C2=250度,r3=180, T3=5, C3=350度,r4=200,T4=60,c4=410,r5=0,T5=0,C5=0度。。。。r32=0,t32=0,c32=0,設置好后等幾秒鐘,程序會自動保存。

再打開啟動開關(綠開關)-----------程序自動運行,自動結束。如果出現不運行,再檢查“RUN”設置為“3”,pro= “ 1 ”  。

 

程序段

R:斜率(min/℃)

T:保溫時間

C:目標溫度

1

200

5

180

2

180

5

250

3

180

5

350

4

200

60

410

3          SKD-2000全自動定氮儀

樣品消化好后,冷卻至室溫。

蒸餾設置:堿45ml,稀釋液40ml,標準酸0.0953(mo/l),蒸餾功率100%,蒸餾時間6分鐘,硼酸儀器自動加。

【實驗結果/結論】

編號

樣品重量g

空白(ul

標準酸濃度mo/l

樣品消耗量ml

蛋白含量%

1

0.9627

65

0.0953

14.883

12.8437

2

0.8475

65

0.0953

13.102

12.8362

3

0.8428

65

0.0953

12.970

12.7768

4

0.9478

65

0.0953

14.635

12.8275

5

0.9904

65

0.0953

15.322

12.8543

6

0.9252

65

0.0953

14.267

12.8087

平均值:12.8245

RSD(相對標準偏差值): 0.002%

【儀器/耗材清單】

儀器

1)      實驗室用樣品粉碎劑或研缽

2)      分樣篩:40目(孔徑0.45mm)

3)      分析天平:感量0.0001g

4)      消化爐(SKD-08S2)

5)      容量瓶100ml

6)      滴定管:10、25ml

7)      消化管:300ml

8)      定氮儀SKD-2000


試劑

1)       硫酸:化學純,含量為98%,無氮。

2)       混合催化劑:1g硫酸銅,9g硫酸鉀,均為化學純,磨碎混勻。

3)       氫氧化鈉:化學純,40%水溶液(m/v)。5%水溶液(m/v)

4)       硼酸:化學純,2%水溶液(m/v)。

5)       混合指示劑:甲基紅0.1%乙醇溶液,溴甲酚綠0.5%乙醇溶液,兩溶液等體積混合,在陰涼處保存期為三個月。

6)       鹽酸標準溶液:c(HC1)=0.1mol/L。8.3ml鹽酸(分析純),注入1000ml蒸餾水中。

7)       硼酸吸收液:2%硼酸溶液(20 g/L):稱取100 g硼酸,加水溶解后并稀釋至5000 mL。加入(1:3.5混合指示劑6ML)搖勻,再加入5%的氫氧化鈉稀釋溶液0.35ML搖勻,顏色呈紫紅色。



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