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熒光定量PCR儀介紹

Real-Time PCR 技術,又稱實時定量熒光PCR,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行總量分析或通過Ct值對模板進行相對定量。


介紹

熒光定量PCR的光學系統

熒光檢測系統

旋轉機制:

(1)成本低廉,高溫均一性好。

(2)不太容易操作,對于低溫儲存不支持。

(3)需要特殊的加樣支架和耗材


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掃描機制:

(1)檢測時間之后,需要更多的檢測時間。

(2)價格便宜,操作方便,校正容易。

CCD:

(1)能夠同時檢測。

(2)價格不便宜,校正很困難。


激光光源

Lamp

(1)對于多通道以及多種不同的光路顏色都適用

(2)對2D傳感器方案唯一適用

(3)對高能量分析系統適用


LED

(1)一般用于孔掃描模式

(2)有比較多相對可選的光路顏色

(3)價格和維護的成本比較低


Laser:

(1)只能夠在逐孔掃描模式下使用

(2)光路的顏色有限

(3)價格和維護的成本比較高

(4)能量高,信號不容易受到干擾。


熱模塊系統

空氣離心加熱模塊

1.不方便加樣

2.偏低的通量(32或者72)

3.比較差的溫控準確性

4.很好的溫度均一性

5.比較快的升降溫度(高于每秒5攝氏度)

半導體加熱模塊

1.比較差的溫控均一性

2.比較慢的的升降溫度

3.很好的溫控準確性

4.比較方便加樣

5.有很高的通量


熒光定量PCR儀的選擇標準

1.靈活性

2.運行速度

3.硬件設計特點

4.耗材的開放性

5.儀器的通道數量

6.儀器的檢測通量(反應孔數)

7.儀器使用的廣泛程度


2019-06-18 17:32:19 瀏覽次數:173次

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